qrt-pcr检测服务
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qRT-PCR(定量逆转录聚合酶链式反应) 是一种结合了逆转录(RT)和实时荧光定量PCR(qPCR)的技术,用于检测和定量RNA分子。其基本原理是先将RNA逆转录为cDNA,再通过qPCR对cDNA进行扩增和定量。qRT-PCR广泛应用于基因表达分析、病原体检测、基因突变分析等领域。
主要步骤:
RNA提取:从样品中提取总RNA。
逆转录:使用逆转录酶将RNA转化为cDNA。
qPCR:通过荧光信号实时监测cDNA的扩增,定量目标基因的表达水平。
优点:
高灵敏度:可检测低丰度的RNA。
高特异性:通过特异性引物和探针确保扩增的特异性。
定量准确:实时监测扩增过程,精确定量目标RNA。
为确保qRT-PCR实验的准确性和可靠性,样品寄送需满足以下要求:
样品类型:
RNA样品:浓度≥50 ng/μL,总量≥1 μg,A260/A280比值在1.8-2.0之间。
组织样品:新鲜或冷冻保存,重量≥50 mg,避免反复冻融。
细胞样品:细胞数≥10^6,使用RNA保护剂保存。
血液样品:使用抗凝剂处理,体积≥1 mL,避免溶血。
样品保存:
RNA样品应置于无RNA酶的离心管中,-80℃保存,干冰运输。
组织和细胞样品应使用RNA保护剂或液氮保存,干冰运输。
血液样品应4℃保存,冰袋运输。
样品标记:
每个样品需清晰标记样品编号、名称、日期等信息。
提供样品清单,包括样品编号、类型、浓度、体积等。
运输方式:
使用干冰或冰袋运输,确保低温。
选择可靠的快递公司,确保样品及时送达。
其他要求:
提供实验目的、目标基因、引物序列等信息。
如有特殊要求,提前沟通。
注意事项:
避免样品污染,确保操作环境无RNA酶。
运输过程中避免剧烈震动和温度波动。
遵循以上要求,可确保样品质量和实验结果的可靠性。如有疑问,请及时联系实验室